劳动仲裁调解书签字后，劳动纠纷聊天记录证明已经和解，不可以再反悔。劳动仲裁调解书系仲裁委在处理劳动争议过程中依法对双方的争议进行调解，达成协议即生效了，是不能反悔的。《劳动争议调解仲裁法》第42条规定：调解书经双方当事人签收后，发生法律效力。最高人民法院《关于审理劳动争议案件适用法律若干问题的解释》（三）第十一条规定：劳动人事争议仲裁委员会作出的调解书已经发生法律效力，一方当事人反悔提起诉讼的，人民法院不予受理；已经受理的，裁定驳回起诉。