机动车驾驶员实习期内开车上高速不一定会被处罚。

一、规定

根据最新修订的《机动车驾驶证申领和使用规定》，驾驶人在实习期内驾驶机动车上高速公路行驶，应当由持相应或者更高准驾车型驾驶证三年以上的驾驶人陪同。陪同的驾驶人应乘坐在副驾驶位置，对实习驾驶人进行指导。无驾驶员陪同或陪同驾驶员不符合要求的，将被处200元罚款。 ；

二、实习期的计算

机动车驾驶员的实习期在《机动车驾驶证申领和使用规定》中的规定为，车驾驶人初次申请机动车驾驶证和增加准驾车型后的12个月为实习期；实习期被延长的，“初次领证日期”之日起的24个月为实习期。在实习期内驾驶机动车的，应当在车身后部粘贴或者悬挂统一式样的实习标志。